D-Luciferin，potassilum D-荧光素钾盐 分子生物试剂

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐产品描述

D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐
D-荧光素也常用于体外研究，包括荧光素酶和ATP水平分析；报告基因分析；高通量测序和各种污染检测。目前市场上有三种产品形式，D-荧光素（游离酸），D-荧光素钠盐，以及D-荧光素钾盐。这三种产品主要的差别在于溶解特性上。D-荧光素（游离酸）水溶性以及缓冲体系的溶解性都很弱，除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇（10 mg/ml）和DMSO（50 mg/ml）。但钠盐和钾盐形式的D-荧光素能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成液体后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。

 产品性质

中文别名（Chinese synonym）

D-荧光素钾盐；

英文别名（English synonym）

(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt; D-Luciferin firefly, potassium salt;

CAS号（CAS NO.）

115144-35-9

分子式（Formula）

C11H7N2O3S2 K

分子量（Molecular weight）

318.42 g/mol

外观（Appearance）

淡黄色粉末

溶解性（Solubility）

溶于水（60 mg/ml）

纯度（Purity）（HPLC）

＞99%

运输和保存方法

  冰袋运输。-20℃干燥避光保存。

使用方法

1．体外生物发光检测

1）用蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成100 mM的储存液（200×，浓度30mg/ml）。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。

2）用预热好的组织培养基1:200稀释储存液，配制工作液（终浓度150µg/ml）。

3）去除培养细胞的培养基直至无残留。

4）待图像分析前，向细胞内添加1×荧光素工作液，然后进行图像分析（或者细胞放在37℃短时间孵育后检测可增强信号）。

2．    活体成像分析

1）用无菌的DPBS（w/o Mg2+）配制D-荧光素钾盐工作液（15mg/ml），0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。一旦使用，放到4℃解冻，保持冰冷且避光。

 2） 注射量取决于注射方式，具体如下：

注射方式

剂量

静脉注射（25-27gauge针头）

按10µl/g体重浓度，加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液

腹腔注射（25-27gauge针头）

按10µl /g体重浓度，加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液

肌肉注射（27gauge针头）

50µl，浓度为1-2mg/ml荧光素工作液

鼻内注射（pipette）

50µl，浓度为3mg/ml荧光素工作液

3） 注射入体内10-20 min（待光信号达到zui强稳定平台期），再进行成像分析。

注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定zui高信号检测时间和信号平台期。