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RNase A作用
核糖核酸酶 A (Ribonuclease A)来源于牛胰,为高度专一性核酸内切酶,可特异攻击 RNA 上嘧啶核苷酸的C′3上的磷酸根和相邻核苷酸的C′5之间的键,产物为3′嘧啶单核苷酸或以3′嘧啶核苷酸结尾的低聚核苷酸。可除去DNA:RNA或RNA:RNA杂合体中未杂交的 RNA 区;可用来确定 DNA 或 RNA 中单碱基突变的位置, 用标记了的RNA探针与待检含单碱基置换的DNA或RNA退火,RNA:RNA或RNA:DNA中的错配碱基可被RNaseA切割。广泛用来去除 DNA 样品中的 RNA 。
RNase A溶液配制
将RNase A溶解在0.001mol/l醋酸钠(ph5.2)中,使终浓度为10mg/ml,加热到100°C,15min.室温下缓慢冷却,用0.1体积的1M的Tris-Cl调整pH至7.4后,小管分装保存在-20°C.
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